一、简介
PCR是聚合酶链反应(polymerase chain reaction)的简称，是在短时间内体外大量扩增特定的DNA段的分子生物学技术。自动完成聚合酶链反应，提供DNA 扩增的温度条件而设计的仪器称为PCR仪。
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二、 PCR仪温度校准的项目及必要性
一个稳定的温度循环是成功实现PCR所必需的。其中温度控制的动、稳态特性是影响PCR扩增结果正确与否的重要因素之一, 这包括温度准确性、升降温速度、温场均匀性、max超调温度。
（一）、温度准确性
温度准确性是PCR仪重要的性能指标，如温度准确性低可直接造成非特异性扩增，甚至是错误的扩增结果，造成假阳性和假阴性。
市场上各家厂商考核基因扩增仪（PCR仪）性能的主要指标，一般厂家的企业指标为±0.5℃，一些性能较好的产品可以实现的温度准确度为±0.3℃。故需对PCR仪控温准确度进行测试。
校准实验平均温度的计算公式为：I—参加检测的温度探头序号；n—参加检测的温度探头的数量
（二）、温场均匀性
由于PCR仪加热器加热不均匀，导致PCR仪模块上各孔存在一定温差。造成试验结果偏差。一般PCR仪边缘点的温度低于中间区域，所以均匀性为PCR仪重要的性能指标。一般厂家的企业指标规定均匀性为±0.5℃，一些性能较好的产品可以实现的温度均匀度为±0.3℃。
校准实验时，通过选取孔板中16个特殊反应位置来测量温度，并得出孔板的温度均匀性。均匀性为各个探头在同一时刻max温度与min 温度的差值。均匀度计算公式为：tmax-tmin
（三）、升降温速率
PCR扩增产物数量的多少决定了PCR的效率。为了在短时间内获得尽可能多的产物，需要仪器在升降温段具有按照预设升降温速率快速升温和降温的能力（max-升温速率达15~20℃）。一个完整的PCR过程，是由若干个升温→恒温→降温循环构成的。因为“变性”，“退火”和“延伸”3个阶段是必须要保证的。因此，只有使升降温的过程尽可能地迅速，才能缩短每个PCR循环以及整个PCR 过程所需时间。一般厂家的企业指标规定升温速率为±3℃/sec。
仪器校准实验时，升温速率为温度从40℃到90℃的时间；降温速率为温度从70℃到35℃的时间。
（四）、max-超调温度
当温度从一定点温度调节到另一定点温度,就会产生温度的超调。超调温度过大同样会对试验产生影响，所以校准实验时，需要计算max-超调温度和平均超调温度。
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三、解决方案
根据基因扩增仪(PCR仪)测温系统校准规范温度校准系统，依据<YYT1173-2021聚合酶链反应分析仪> 行业标准，*符合《JJF 1527-2015 聚合酶链反应分析仪校准规范》的要求，我们公司推出了PCRCAL来校准pcr仪。
具体方案 产品包括ZCPCRCAL-96W、ZCPCRCAL-96S、ZCPCRCAL-48S、ZCPCRCAL-32S。4种型号，可满足大多数 24孔，48孔，96孔的PCR仪的计量校准需求。、
系统采用高精度多路测温仪，高精度/高灵敏度的热敏电阻探头，采用加工工艺，保证探头与孔间的充分接触，应用专业的温度验证系统软件，实现校准自动化，自动保存原始记录，自动生成校准报告。校准过程中，系统软件实时记录数据，并生成趋势图；系统自动计算校准结果所需要的温度示值误差、温度均匀性，升降温速率等参数。
为保证系统的测量精度实现系统传感器温度的标定，可使用PCR仪温度验证系统软件 配合我公司提供的ZCTB系列高精度恒温槽，校准等温块，高精度多路测温仪，二等标准温度计等装置对验证探头进行校准。
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